天天用充足的时辰来均衡色谱柱,您就会在处置题目方面取得的"弥补",并且您的色谱柱的寿命也会变得更长!------ 必然得做!
新的色谱柱在利用之前应当在您本身的液相色谱仪长停止机能测试,即利用色谱柱附带的查验报告上测试前提和样品来测定该色谱柱的柱效。并且,在今后的利用中,合时常对色谱柱停止测试。
均衡色谱柱
反相色谱柱在颠末出厂测试后是保管在乙腈/水中的。请必然确保您所利用的活动相和乙腈/水互溶。因为色谱柱在贮存或运输进程中可以或许会干掉,是以在用活动相阐发样品之前,应利用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈均衡色谱柱;若是您所利用的活动相中含有缓冲盐,应注重用纯水"过渡"。
硅胶柱或极性色谱柱在颠末出厂测试后是保管在正庚烷中的。若是该色谱柱须要利用含水的活动相,请在利用活动相之前用乙醇或异丙醇均衡
若何均衡色谱柱?
均衡进程中,将流速迟缓地进步用活动相均衡色谱柱直到取得不变的基线(缓冲盐或离子对试剂度若是较低,则须要较长的时辰来均衡)
色谱柱的再生
停止色谱柱再生时,应利用一个谦价的泵,咱们倡议不利用您的液相色谱仪上的泵。
倡议用来冲刷的溶剂体积
注重:
在对NH2改性的色谱柱停止再生时,因为NH2可以或许成铵根离子的情势存在,是以应当在水洗后用0.1M的氨水冲刷,而后再用水冲刷至碱溶液完整流出。
**若是简略的无机溶剂/水的处置不可以或许完整洗去硅胶外表吸附的杂质,用0.05M稀硫酸冲刷很是有用。
色谱柱的掩护
1.利用预柱掩护阐发柱(硅胶在极性活动相/离子性活动相中有必然的消融度)
2.大大都反相色谱柱的pH不变规模是2-7.5,尽可能不跨越该色谱柱的pH规模
3.防止活动相构成及极性的猛烈变更
4.活动相利用前必须经脱气和过滤处置
5.若是利用极性或离子性的缓冲溶液作活动相,应在尝试终了柱子冲刷清洁,并保管大乙腈中
6.压力降低是须要改换预柱的旌旗灯号
卡套柱的装置(不加预柱)
1.将卡套架套入柱芯
2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高于夹套
3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高过夹套片
4.将卡套帽和卡套架旋在一路,而后用手拧紧
5.而后依一样的挨次毗连好柱子的另外一端
6.毗连到液相色谱仪,PEEK讨论手拧便可;若为不锈钢讨论应利用扳手
注重:利用卡套柱时,两头的卡套合时刻毗连在柱芯上。不论您是均衡色谱柱或是洗濯,任什么时辰候都不能将卡套取上去,不然会形成填料的散失。
卡套柱的装置 (加预柱)
1.将卡套架套入柱芯
2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使夹套高于柱芯
3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高过夹套片
4.将"字弹头"预柱放入卡套片内
5.将卡套帽和卡套架旋在一路,而后用手拧紧
6.而后依一样的挨次毗连好柱子的另外一端
总而言之
1)柱子在任何环境下不能碰撞、曲折或激烈震撼;
2)当柱子和色谱仪毗连时, 阀件或管路必然要洗濯清洁;
3)要注重活动相的脱气;
4)防止利用高粘度的溶剂作为活动相;
5)进样样品要提纯;
6)严酷节制进样量;
7)天天阐发任务竣事后,要洗濯进样阀中残留的样品;
8)天天阐发测定竣事后,都要用恰当的溶剂来洗濯柱;
9)若阐发柱持久不利用,利用恰当无机溶剂保管并封锁;